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液氮保藏菌种原理

液氮保藏菌种原理

菌种保藏就是对活体微生物群体进行有效的保存,使菌体不死、不衰、不变,以便于研究和应用。菌种保藏方法有很多种,保藏的原理是运用干燥、低温和隔绝空气的手段,降低微生物菌株的新陈代谢速度,使菌体生命活动处于半永久性休眠状态,从而达到保藏目的。

液氮超低温保藏法原理是将细胞冷冻,使其代谢活动停止,从而使细胞处于休眠状态中长期保存。一般来说,保藏温度越低,效果越好。在液氮中,温度可达到-196℃,因此从适用的微生物范围、存活期限及状态稳定性等方面来看,液氮超低温保藏法是较理想的一种保藏方法。

在-196℃下保藏菌种,其存活率受降温过程冷冻速度的影响特别显著。一般菌种悬液中要加入防冻剂,最常用的冷冻保护剂是二甲亚砜和甘油,缓慢冷冻效果较好。

此法保藏菌种一般达二十年以上,除适宜于一般微生物的保藏外,对一些用冷冻干燥法都难以保存的微生物,如支原体、衣原体、氢细菌、难以形成孢子的霉菌、噬菌体及动物细胞也可长期保藏,而且性状不变异。对那些在培养基上只产生菌丝体的真菌,其中尤以担子菌内的菌株,必须采用此法保藏,才可获得满意的效果。此法操作技术并不复杂,只要有液氮罐或液氮冰箱设备,便可操作。


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